Leon S. Kennedy
Personagem já conhecido de outros títulos da série, Leon surgiu na série como um policial novato, recém-saído da academia de polícia para trabalhar no Departamento de Polícia de Raccoon (RPD). Desta vez, ele está bem mais preparado e tem consciência de seus deveres como membro da organização anti-Umbrella da qual faz parte.
Barry Burton
O famoso expert em armas e ex-membro da SWAT, com uma imensa bagagem de experiência na área, Barry teria ingressado na organização depois do fim dos S.T.A.R.S., logo após o Incidente da Mansão. Sua missão ao seguir para o cruzeiro Starlight é a de encontrar Leon, mas acaba descobrindo muito mais do que apenas o companheiro de equipe em apuros.
Lucia
A pouca informação que se tem a respeito da única sobrevivente do Starlight é a de que Lucia é uma órfã, que estava a caminho de parentes na Europa quando o incidente no cruzeiro aconteceu. Lucia é uma menina diferente das demais, e essa diferença a ajudou a ser adotada por uma boa família, mas também acabou lhe trazendo grandes complicações.
HQ
Tem a única e exclusiva função de conduzir e dar ordens a Leon e Barry diretamente do “quartel general” da organização anti-Umbrella da qual a dupla faz parte, e, por isso, a sua participação no game é bastante limitada.